建立高效液相色谱-串联质谱法测定小麦和玉米中19种真菌毒素的检测方法。样品经乙腈∶水∶甲酸(80∶18∶2)溶液提取、离心、浓缩后，以C18色谱柱分离，甲醇-甲酸水溶液为流动相梯度洗脱，采用电喷雾正负离子(ESI+、ESI-)同时电离，多反应监测模式检测，同位素内标法定量。19种真菌毒素在一定含量范围内均具有良好的线性关系(R~2≥0.992),定量限范围为0.12～30μg/kg,在低、中、高3个添加浓度水平下的回收率范围为61%～117%,相对标准偏差小于15%(n=6),满足日常检测方法性能要求。本方法操作简便、灵敏度高、重现性好，适用于小麦、玉米等粮食中多种真菌毒素的同时测定。