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伴随着农业食品安全的快速发展和生态环境安全的要求提高,新型环保型农药开发与应用在农业生产中十分重要.动物源农药因其选择性好、环境友好等特点,具有巨大的发展空间和前景.本文围绕来源于节肢动物毒素小肽,综述蜘蛛、蝎子、蜈蚣来源小肽在杀虫、杀菌中的研究进展,以及潜在的应用前景.

Keyword ：

毒素 生物农药 节肢动物 肽

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新型冠状病毒SARS-CoV-2的主蛋白酶(Main Protease, Mpro)，也称为3-糜蛋白酶样蛋白酶(3CLpro)，在病毒复制的过程中发挥核心作用。Mpro的结构和功能在β-冠状病毒中相对保守，在人体内没有同源蛋白，因此是抗病毒药物开发的关键靶点。本研究完成了SARS-CoV-2 Mpro的原核表达与纯化，获得具有高纯度和高均一性的蛋白质样品。利用气相扩散坐滴法开展了Mpro的结晶筛选，获得单晶体后将其浸泡在由谷胱甘肽包裹的金团簇纳米材料溶液中，成功解析了仅有第156位半胱氨酸结合一个金离子的一个新型X射线衍射晶体结构。结构分析发现，Mpro蛋白的Cys156结合金离子后Asp153~Cys156区域的构象发生了~0.6 Å的偏移，推测该构象变化进一步通过变构效应抑制Mpro的生物功能，为新冠病毒的纳米型抑制剂的研发提供了新的信息。

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金团簇 Gold Cluster X射线晶体结构 蛋白质表达与纯化 Mpro SARS-CoV-2 X-ray Crystal Structure Protein Expression and Purification

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硫芥是一类具有高反应活性的化学战剂,可造成多靶点损伤和糜烂,但其毒性及损伤机制至今尚未完全明确.本研究采用微量定向合成方法制备了8种芥子气类似物,并采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UPLC-MS/HRMS)技术和高效液相色谱-三重四极杆质谱联用(HPLC-MS/MS)技术考察了其分别在孵育液、血浆和细胞等基质中,与谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸(Cys)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)形成加合物的速率与丰度差异.结果表明,在孵育液中,硫芥均可与这3种硫醇分子发生加合反应;在血浆基质中,Cys与硫芥加合物的含量高于GSH与硫芥加合物的含量,而NAC与硫芥的加合物的种类较少,这可能是由于NAC的含量较低或质谱响应差所导致;在染毒细胞基质中,GSH与硫芥加合物的含量高于Cys与硫芥加合物的含量,其原因是这3种硫醇分子的自身反应活性以及血浆和细胞中硫醇分子含量均存在显著差异.

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谷胱甘肽 硫芥 半胱氨酸 N-乙酰半胱氨酸 加合物

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从西藏墨脱嘎隆拉山海拔3 000m土壤中分离出一株革兰氏阳性类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.),用Illumi-na Hiseq测序平台进行全基因组测序以及通过Prokka1.14.6 软件进行基因组注释.结合antiSMASH 7.0 和BAGEL 4 分析Paenibacillus sp.基因组预测次级代谢产物生物合成基因簇.为了验证代谢产物路径,用不同破碎方法提取菌株全蛋白,通过蛋白质组质谱技术进行分析,结合不同蛋白质组分析软件,共鉴定了3 383 个蛋白质.通过同源比对,提取的蛋白质中可以检测到套索肽生物合成基因簇中依赖ATP半胱氨酸蛋白酶N端区域B1 和ABC转运器.同时,用BAGEL4 软件blastp功能从NCBI数据库中获取Paenibacillus sp.基因组中潜在完整的套索肽生物合成基因簇.

Keyword ：

基因组 基因簇 蛋白质组 类芽孢杆菌 次级代谢产物

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目的 探究苏拉明(Sur)在对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠急性肝损伤模型中的作用及机制.方法 将8～10周龄C57BL/6J小鼠随机分为APAP组和APAP+Sur组(提前1 h注射20 mg/kg Sur),饥饿18 h后腹腔注射400 mg/kg APAP建立小鼠急性肝衰竭模型并统计存活情况;小鼠急性肝损伤模型为腹腔注射300 mg/kg APAP(其他条件不变),并增加Control组,分别在APAP处理后0、2、12h收取肝脏组织和血清.ELISA法和CBA技术检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的释放和炎症因子的分泌;HE染色和免疫组化检测肝组织坏死和炎性细胞浸润;DCFA-DH法和ELISA法检测肝组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)以及谷胱甘肽(GSH)水平;免疫印迹法检测肝组织中JNK信号通路的活化.结果 苏拉明处理可提高APAP诱导小鼠存活率,降低血清中转氨酶和炎性因子释放,减轻APAP诱导的肝细胞坏死和肝内炎性细胞浸润.机制研究发现,苏拉明处理可延缓APAP诱导的肝内GSH耗竭,降低MDA和ROS水平,并抑制JNK通路活化.结论 该研究证实了苏拉明在对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤中的保护作用,其机制可能与氧化应激、炎症相关.

Keyword ：

药物性肝损伤 氧化应激 苏拉明 JNK信号通路 对乙酰氨基酚

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合成了一种反应型近红外荧光探针N-Rh-GSH,该探针以罗丹明衍生物为荧光母体，通过与谷胱甘肽(GSH)作用触发螺环的开关来实现信号的响应，其开环释放的荧光产物具有760 nm的近红外发射波长。细胞实验表明，该探针可实现对活细胞中GSH的成像。

Keyword ：

谷胱甘肽 近红外 反应型 荧光探针

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菁染料具有优秀的光学性质，常用于肿瘤组织的实时可视化荧光成像。但普通菁染料成像背景较高，对肿瘤组织的靶向能力差。将菁染料自组装成纳米粒子可使染料形成聚集并实现荧光淬灭(聚集淬灭效应),降低其在普通组织的成像背景；同时，纳米粒子的高渗透长滞留效应(EPR效应)可提高染料对肿瘤组织的靶向能力。本文设计合成了一种双硫键双菁染料(SO_3Cy7-ss-Cy7.5),该染料由于两亲性的特性易在水溶液中自组装成纳米粒子，荧光淬灭高达92%;当纳米粒子与谷胱甘肽(GSH)响应后，淬灭的荧光逐渐恢复，最终实现16倍的荧光强度增强。因此，该双菁染料具有良好的肿瘤组织高分辨成像潜力。

Keyword ：

荧光成像 纳米粒子 荧光淬灭 双硫键双染料

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目的登革病毒(dengue virus, DENV)的NS5蛋白主要起RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)作用, 本研究旨在通过构象型噬菌体展示肽库筛选潜在的抗病毒前体药物。方法以可溶性重组DENV-2 NS5蛋白为靶点, 从构象型噬菌体展示肽库中筛选高特异性寡肽(oligopeptide, OP), 并通过分子对接技术验证OP与RdRp之间的相互作用。将感染DENV-2的C6/36细胞暴露于不同浓度的OP中, 并通过RT-qPCR检测病毒滴度, 以此来评估OP的抗DENV-2作用。同时, 将C6/36细胞暴露在较高浓度的OP中进行培养, 并通过CCK-8法测定细胞活性以评估OP的细胞毒性。结...

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分子对接 寡肽 RNA聚合酶 登革病毒 新型冠状病毒

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本研究利用扫描电化学显微镜（SECM）技术在生理条件下对人正常乳腺上皮细胞（MCF-10A）受氯化镉刺激的形态变化和活性氧物种（ROS）释放情况进行了实时检测.结果表明，MCF-10A细胞在低浓度或短时间的氯化镉刺激下呈现收缩防御模式；但受到高浓度或长时间的氯化镉刺激时，细胞对氯化镉毒性的防御能力降低，细胞内氧化还原平衡态受到破坏，造成严重的氧化损伤.并利用荧光探针DCFH-DA法证实了扫描电化学显微镜技术检测结果的正确性和可靠性.此外，通过对镉作用下细胞内还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶，超氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽（GST）活性的测定，进一步分...

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氧化损伤 H_2O_2 扫描电化学显微镜(SECM)

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目的 探讨血液标本放置的时间对生化检验结果的影响.方法 收集北京工业大学医院2021年1月～6月期间289例门诊患者的血液标本,男性血液标本112份(39％),女性血液标本177份(61％),将每份标本一分为二放置4 h、12 h后,对血液标本中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、甘油三酯(TG)、总胆红素(TB)、钾离子(K+)、磷离子(P-)、血糖(GLU)、总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)等指标进行检测分析.结果 289份血液标本中,放置4 h后的指标检测结果与放置12 h后的指标检测结果相比较,差异有统计学意义(P<0.05).ALT、GGT、TG、TB、P-、GLU指标随放置时间的增加,检测结果值下降(P<0.05);AST、ALP、K+、TP、TC指标随放置时间的增加,检测结果值上升(P<0.05).结论 血生化检验需尽量缩短标本存放时间,尽快进行检测分析.

Keyword ：

血液标本 放置时间 生化检验结果

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