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纪光红 (纪光红.) | 阎新龙 (阎新龙.) | 王海洋 (王海洋.) | 张彪 (张彪.) | 曾泉 (曾泉.) | 周军年 (周军年.) | 范增 (范增.) | 黄映辉 (黄映辉.) | 岳文 (岳文.)

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CQVIP PKU CSCD

Abstract:

目的 构建沉默信息调节因子(silent information regulaor,Sir)样蛋白1(Sirtuin 1,SIRT1)的特异性短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,获得敲低SIRT1的肝癌细胞系,以探讨其对肝癌细胞的增殖和耐药敏感性的作用.方法 设计针对SIRT1靶点特异性的干涉序列,连接到经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切的pSicoR-GFP载体,慢病毒包装293T产生病毒,感染肝癌细胞,建立肝癌细胞SIRT1低表达的稳定株.利用实时定量PCR检测SIRT1的干涉效果;通过平板克隆形成实验、CCK8细胞增殖实验检测SIRT1被干涉后对肝癌细胞增殖能力的影响;通过细胞耐药敏感性实验及实时定量PCR检测耐药基因的表达,考察SIRT1干涉对肝癌细胞耐药敏感性的影响.结果 实时定量PCR实验证明该慢病毒干涉载体能显著抑制肝癌细胞中SIRT1的表达,SIRT1干涉可抑制肝癌细胞的增殖能力,下调耐药基因的表达,增强肝癌细胞的药物敏感性.结论 SIRT1抑制肝癌细胞耐药性.

Keyword:

RNA干扰 间充质干细胞 沉默信息调节因子样蛋白1 基因敲除 聚合酶链反应 肝癌 耐药

Author Community:

  • [ 1 ] [纪光红]广西医科大学,南宁 530000;军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室,北京 100850
  • [ 2 ] [阎新龙]北京工业大学
  • [ 3 ] [王海洋]解放军军事医学科学院
  • [ 4 ] [张彪]解放军军事医学科学院
  • [ 5 ] [曾泉]军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室,北京 100850;华南生物医药研究院,广州 510005
  • [ 6 ] [周军年]军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室,北京 100850;华南生物医药研究院,广州 510005
  • [ 7 ] [范增]军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室,北京 100850;华南生物医药研究院,广州 510005
  • [ 8 ] [黄映辉]北京工业大学
  • [ 9 ] [岳文]军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室,北京 100850;华南生物医药研究院,广州 510005

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Source :

军事医学

ISSN: 1674-9960

Year: 2017

Issue: 2

Volume: 41

Page: 90-95

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