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在研究HIV-1整合酶(IN)抗药性突变T66I时,发现这一突变同时可以提高整合酶的溶解性.原核表达了IN1-288/T66I和野生型(WT),取菌体破碎后的上清,SDS-PAGE和his标签蛋白质染色进行分析,结果表明IN1-288/T66I可溶性约是WT的2.4倍.600 ml培养基中诱导表达IN1-288/T66I/BL21,亲和层析纯化共收获蛋白质4.72 mg.用改进的ELISA方法测定IN1-288/T66I 和IN1-288/F185K/C28OS链转移催化活性,结果显示两种蛋白质活性基本相当.提供了有别于F185K/C28OS突变的另外一种整合酶可溶性表达的途径,IN1-288/T661重组蛋白还可以应用到整合酶抑制剂筛选中,以获取避开T66I抗药性突变的抑制剂.
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中国生物工程杂志
ISSN： 1671-8135
Year： 2010
Issue： 8
Volume： 30
Page： 17-21
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