基于上转换发光技术和免疫层析技术对氯霉素定量检测方法，属于纳米生物标记领域、免疫学领域以及光学检测领域。主要基于以下方面：将200nm-300nm的上转换荧光纳米颗粒进行羧基化修饰，使之成为水溶性好，分散性高且易于与生物分子偶联的标记物；将样品垫、上转换标记物处理过的结合垫、抗原抗体点样过的硝酸纤维素膜(NC膜)和吸水纸通过粘性底衬结合起来，抗原为氯霉素-BSA做检测线(T)，抗体为羊抗鼠抗体做质控线(C)，且相距0.5cm。用切条机将组装好的试纸切成长6cm，宽4mm的试纸条，装备成壳，建立免疫层析试纸；将不同浓度梯度的氯霉素标准抗原加于试纸壳中的样品垫里，经10-15min静置后，放于上转换检测器里进行检测。本发明制备工艺和操作简单，不需要复杂的仪器设备就能完成，既快速又灵敏，对准确定量检测食品中氯霉素含量有重要意义。